消化时间对大鼠胰岛分离纯化产量的影响

• 作者: 丁亚山 胡先平 钱滔来
• 来源期刊: 中国当代医药
• 学科: 医学
• 关键词: 消化时间 大鼠 胰岛 产量
• 年，卷（期）: 2012,（14）
• 所属期刊栏目: 实验研究
• 页码范围: 27-28,30
• 分类号: R2-33
• 字数: 1925字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1674-4721.2012.14.012

摘要

目的 观察消化时间对大鼠胰岛分离纯化产量的影响,筛选出获取高产量胰岛素的最佳消化时间.方法 将75只雄性SD 大鼠根据随机化原则按消化时间分为5组:Ⅰ组(10 min)、Ⅱ组(12.5 min)、Ⅲ组(15 min)、Ⅳ组(17.5 min)和Ⅴ组(20 min),每组15只.通过胆总管灌注胶原酶Ⅴ来消化大鼠胰腺,分离胰岛,采用不连续密度梯度Ficoll离心法纯化胰岛.以双硫腙染色鉴定胰岛,丫啶橙/碘丙啶染色鉴定胰岛细胞活率,根据胰岛直径计数所获胰岛的数量及胰岛当量,葡萄糖刺激胰岛素释放试验评估胰岛功能.结果 分离的大鼠胰岛具有较好的质量,胰岛纯度为95%左右,活率为90%左右,体外培养中生长良好.在不同消化时间下,各组胰岛产量由低到高为:10 min组<20 min组<12.5 min组<17.5 min组<15 min组.消化时间在15 min时,获得胰岛产量最高(P < 0.05),获得的胰岛数量和IEQ量分别为445.27±66.50和614.46±85.50.其次为17.5 min组,获得胰岛数量和IEQ量分别为401.80±62.80和539.84±76.89.在低糖和高糖刺激下胰岛素释放分别为(1.346±0.128) ng/mL和(2.565±0.208) ng/mL,差异具有统计学意义(P < 0.05),刺激指数为1.908±0.152,提示胰岛细胞功能良好.结论 进行大鼠胰岛分离纯化时最适宜的胶原酶浓度在最佳消化时间为15～17.5 min,可获得稳定高产量的胰岛,过短和过长的消化时间都是不适宜的.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	胡先平	深圳市第五人民医院麻醉科	7	23	3.0	4.0
2	丁亚山	深圳市第五人民医院麻醉科	2	5	2.0	2.0
3	钱滔来	深圳市第五人民医院麻醉科	1	2	1.0	1.0