猪圆环病毒Ⅱ型Cap、Rep基因原核表达质粒的构建与表达

• 作者: 于飞飞 任林柱 曹宇航 杨鑫 陈福旺
• 来源期刊: 中国农学通报
• 学科: 农学
• 关键词: 猪圆环病毒Ⅱ型(PCVⅡ) 原核表达 Western-blotting
• 年，卷（期）: 2012,（20）
• 所属期刊栏目: 兽医-应用研究
• 页码范围: 98-101
• 分类号: S852.659.2
• 字数: 2953字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1000-6850.2012.20.019

摘要

为进一步建立猪圆环病毒Ⅱ型(PCVⅡ)的有效检测方法,以及制备结构蛋白Cap和非结构蛋白Rep的单克隆抗体.根据GenBank中登录的PCVⅡ序列,设计2对特异性引物,PCR扩增出Cap、Rep蛋白基因,连接到pMD18-T simple质粒上,测序正确的Cap和Rep基因双酶切后分别插入到pACYCDuet-1上,构建成原核表达质粒pACYCDuet-1-Cap、pACYCDuet-1-Rep和pACYCDuet-1-Rep-Cap,然后将上述原核表达质粒转化BL21(DE3),并用IPTG进行诱导表达.结果表明:成功地在大肠杆菌BL21(DE3)中表达了猪圆环病毒Ⅱ型的Cap、Rep蛋白,且Rep、Cap蛋白共表达质粒pACYCDuet-1-Cap-Rep的表达效果优于其他2种质粒.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	任林柱	吉林大学畜牧兽医学院	39	95	5.0	8.0
2	杨鑫	吉林大学畜牧兽医学院	16	102	5.0	9.0
3	于飞飞	吉林大学畜牧兽医学院	3	7	2.0	2.0
4	陈福旺	吉林大学畜牧兽医学院	2	3	1.0	1.0
5	曹宇航	吉林大学畜牧兽医学院	3	3	1.0	1.0