靶向核定位序列siRNA对乙型肝炎病毒共价闭合环状DNA复制的抑制作用

• 作者: 刘晓松 吴祖常 崔金环 杨光 王晓萍 陈姝
• 来源期刊: 广东医学
• 学科: 医学
• 关键词: 小干扰RNA 核定位序列 乙型肝炎病毒 共价闭合环状DNA
• 年，卷（期）: 2012,（20）
• 所属期刊栏目: 基础研究
• 页码范围: 3036-3039
• 分类号: R4
• 字数: 3402字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1001-9448.2012.20.003

摘要

目的 针对乙型肝炎病毒(HBV)核心蛋白羧基端核定位信号(NLS)区设计并化学合成2条小干扰RNA(siRNA),观察其对共价闭合环状DNA(HBV cccDNA)水平的影响.方法 将siRNA转染可稳定分泌HBV颗粒的HepG2.2.15细胞,转染后72 h,采用ELISA方法检测上清液中HBsAg、HBeAg的含量,采用Real-time PCR定量检测细胞内cccDNA及细胞培养上清HBV DNA拷贝数.RT-PCR检测靶基因mRNA的抑制效果.结果 靶向NLS区的2条siRNA均能不同程度地降低HepG2.2.15细胞cccDNA水平,抑制HBV DNA的复制及HBeAg的分泌,对cccDNA的抑制率分别为93.30％和85.00％(P＜0.01),对HBV mRNA抑制率分别为62.80％和48.90％,对HBV DNA抑制率分别为76.56％和66.41％(P＜0.01),对HBeAg抑制率分别为57.25％、43.48％(P＜0.01).而无关序列对HBV DNA与cccDNA的复制和HBeAg表达几乎无干扰作用.结论 靶向HBV核心蛋白C末端核定位序列的siRNA可特异、高效、稳定地显著降低HBV cccDNA水平,抑制HBV DNA复制及HBeAg分泌,为应用RNA干扰治疗HBV感染奠定了一定基础.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	杨光	广东省佛山市第一人民医院临床医学研究所	57	311	8.0	15.0
2	崔金环	广东省佛山市第一人民医院临床医学研究所	39	258	8.0	14.0
3	陈姝	广东省佛山市第一人民医院临床医学研究所	13	47	4.0	6.0
4	吴祖常	广东省佛山市第一人民医院临床医学研究所	6	27	3.0	5.0
5	王晓萍	广东省佛山市第一人民医院临床医学研究所	4	4	1.0	2.0
6	刘晓松	广东省佛山市第一人民医院临床医学研究所	2	2	1.0	1.0