大鼠CD4+CD25-T细胞的Foxp3基因转染及其表达

• 作者: 李永翔 沈继龙 罗庆礼 陆威 霍星星 黄洋
• 来源期刊: 中国组织工程研究
• 学科: 医学
• 关键词: 调节性T细胞 CD4+CD25- T细胞 慢病毒 Foxp3 磁珠分选
• 年，卷（期）: 2012,（18）
• 所属期刊栏目: 移植于免疫
• 页码范围: 3337-3340
• 页数: 4页
• 分类号: R318
• 字数: 4270字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1673-8225.2012.18.024

摘要

背景:调节性T细胞在维持机体免疫应答稳态和免疫耐受方面具有非常重要的作用,但外周血中CD4+CD25+调节性T细胞含量极低,且增殖能力较差.目的:以携带Foxp3基因的慢病毒EGFP+载体转染大鼠CD4+CD25- T细胞,观察其在大鼠CD4+CD25- T细胞中的表达.方法:以免疫磁珠两步法分选大鼠CD4+CD25- T细胞,用携带大鼠Foxp3基因的慢病毒载体体外转染分选的细胞,以转染Foxp3基因的CD4+CD25- T细胞为实验组,EGFP空白质粒组及CD4+CD25- T细胞为阴性对照组,CD4+CD25+ T细胞为阳性对照组.荧光显微镜和RT-PCR分别从蛋白和mRNA水平检测Foxp3基因的表达.结果与结论:成功完成了免疫磁珠的分选,获得了纯度较高的CD4+CD25-T细胞和CD4+CD25+ T细胞,细胞存活率为(94±2)%,慢病毒转染的CD4+CD25- T细胞高表达Foxp3基因.表明以携带Foxp3基因的慢病毒载体系统可有效介导Foxp3基因在大鼠CD4+CD25- T细胞中高表达.