MS-HRM检测游离甲基化SEPT9在结直肠癌早期诊断中的应用

• 作者: 何琼 彭焕玉 朱振宇 李明 王侦 陈华云 陈嘉昌
• 来源期刊: 广东医学
• 学科: 医学
• 关键词: 结直肠癌 SEPT9 甲基化 高分辨率熔解曲线 MS-HRM
• 年，卷（期）: 2012,（12）
• 所属期刊栏目: 临床研究
• 页码范围: 1732-1734
• 分类号: R735.3
• 字数: 3003字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1001-9448.2012.12.015

摘要

目的 建立一种稳定的甲基化敏感高分辨率熔解曲线(MS-HRM)定量检测血浆游离甲基化SEPT9的方法,并初步探讨利用此方法进行结直肠癌早期诊断的可行性.方法 按照不同比例混合甲基化和未甲基化DNA建立标准品,复管反应作出标准熔解曲线,定量检测36例结直肠癌患者血浆样本和20例正常人血浆样本甲基化SEPT9,并与Methylight进行比较.梯度稀释其中1例结直肠癌血浆游离DNA,分析其甲基化程度与DNA量是否独立.随机取2例结直肠癌样本重复甲基化修饰至MS-HRM分析,以排除修饰不完全对实验结果的影响.结果 SEPT9 MS-HRM法可检出混合甲样本中1%的甲基化,其检测灵敏度达1%.36例结直肠癌患者血浆中检测到25例(69.44%)有不同程度SEPT9基因甲基化,20例正常人血浆样本有2例(10%)呈现1%～5%甲基化.不同DNA量甲基化程度恒定,初步确定检测范围可达皮克级DNA.2例独立重复检测样本检测结果基本符合初次实验结果.结论 MS-HRM法检测游离的甲基化SEPT9简单易行,快速,稳定,敏感性高,检测样本范围广,有望为结直肠癌筛查开拓一个新平台.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	李明	南方医科大学生命科学院	212	862	14.0	18.0
2	朱振宇	中山大学中山医学院	51	397	8.0	18.0
3	陈华云	中山大学达安基因诊断中心	31	76	5.0	5.0
4	何琼	中山大学附属第三医院病理科	10	23	3.0	4.0
5	王侦	中山大学中山医学院	5	15	3.0	3.0
6	陈嘉昌	中山大学达安基因诊断中心	15	162	6.0	12.0
7	彭焕玉	中山大学达安基因诊断中心	5	82	4.0	5.0