Wnt-3a/eGFP双表达基因慢病毒载体的构建及其在大鼠骨髓间充质干细胞中的表达

• 作者: 曾荣 林治平 林颢 胡资兵 郑锦畅 陈光华
• 来源期刊: 临床医学工程
• 学科: 医学
• 关键词: 骨髓间充质干细胞 Wnt-3a β-catenin 慢病毒载体 增强型绿色荧光蛋白
• 年，卷（期）: 2012,（10）
• 所属期刊栏目: 实验研究
• 页码范围: 1657-1660
• 分类号: R329
• 字数: 5128字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1674-4659.2012.10.1657

摘要

目的 构建双表达基因慢病毒载体pLV.EX3d.P/puro-EF 1A＞Wnt-3a＞IRES/eGFP,用携带目的基因Wnt-3a及示踪基因增强型绿色荧光蛋白(eGFP)的慢病毒转导大鼠骨髓间充质干细胞(rat Bone marrow mesenchymal stem cells,rBMSCs),建立能够持续激活Wnt信号通路的体外细胞模型.方法 基于GatewayTM技术构建双表达基因慢病毒载体,经293FT包装并释放出病毒转导rBMSCs,检测Wnt-3a以及β-catenin的表达水平.结果 经测序证实目的基因Wnt-3a及示踪基因eGFP片段按正确方向重组入目的载体中.用含Wnt-3a/eGFP的病毒上清转导rBMSCs,转导率超过85％.RT-PCR证实rBMSCs-Wnt3a过表达wnt-3a和β-catenin.结论 携带目的基因Wnt-3a及示踪基因eGFP的慢病毒可以稳定转染rBMSCs,构建了能够持续激活Wnt信号通路的体外细胞模型.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	曾荣	广东医学院附属医院骨科	85	357	9.0	14.0
2	林颢	广东医学院附属医院骨科	46	162	8.0	9.0
3	胡资兵	广东医学院附属医院骨科	24	137	5.0	11.0
4	陈光华	广东医学院附属医院骨科	14	74	5.0	7.0
5	林治平	广东医学院附属医院骨科	10	83	3.0	9.0
6	郑锦畅	广东医学院附属医院骨科	6	32	4.0	5.0