人miR-205真核表达载体的构建及鉴定

• 作者: 吴义高 徐文清 王尉 肖戈 胡卫列 黄福
• 来源期刊: 山东医药
• 学科: 医学
• 关键词: 肾上腺皮质肿瘤 微小RNA 真核表达载体 miR-205
• 年，卷（期）: 2012,（44）
• 所属期刊栏目: 论著
• 页码范围: 20-22,封2
• 页数: 4页
• 分类号: R736.6
• 字数: 2918字
• 语种: 中文

摘要

目的 构建真核表达载体pcDNA3.1(+)-miR-205,并使其在肾上腺皮质癌细胞SW-13中稳定表达.方法 依据miRbase数据库中pre-miR-205序列设计引物,PCR扩增pre-miR-205基因并将其克隆至线性化的pcDNA3.1(+)质粒中,获得重组表达载体pcDNA3.1(+)-miR-205,经双酶切及测序分析后,将其及对照空载体转染肾上腺皮质癌SW-13细胞,采用实时定量RCR法鉴定miR-205在SW-13细胞中表达.结果 酶切和测序结果均证实pcDNA3.1(+)-205重组质粒构建成功,经实时定量RCR检测表明转染pcDNA3.1(+)-205的SW-13细胞中miR-205阳性高表达.结论 真核表达载体pcDNA3.1(+)-205在SW-13中稳定转染,为进一步研究miR-205在肾上腺皮质癌细胞SW-13中的功能及基因调控机制奠定了实验基础.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	胡卫列	广州军区广州总医院泌尿外科研究所	227	941	14.0	20.0
2	王尉	广州军区广州总医院泌尿外科研究所	64	324	9.0	15.0
3	肖戈	南方医科大学研究生学院	3	19	2.0	3.0
4	徐文清	南方医科大学研究生学院	3	19	2.0	3.0
5	吴义高	南方医科大学研究生学院	2	5	1.0	2.0
6	黄福	南方医科大学研究生学院	4	21	2.0	4.0