血管内皮生长因子165真核基因转染载体转染的骨骼肌细胞☆

• 作者: 卢恕来 吴鸿 徐欣 李涛 董刚 郑建金
• 来源期刊: 中国组织工程研究
• 学科: 医学
• 关键词: 血管内皮生长因子 真核表达载体 基因克隆 基因扩增 基因转染
• 年，卷（期）: 2012,（37）
• 页码范围: 6897-6901
• 分类号: R318
• 字数: 3944字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.2095-4344.2012.37.012

摘要

背景:血管内皮生长因子基因转染治疗组织损伤的研究倍受关注,构建稳定可靠的人血管内皮生长因子真核表达载体有重要意义.目的:克隆人血管内皮生长因子基因血管内皮生长因子165片段,构建 pcDNA4-HisMax-C/VEGF165真核表达质粒,并验证其转染大鼠骨骼肌细胞的可靠性.方法:采用反转录-聚合酶链反应技术,从人卵巢癌患者外周血中提取并扩增出血管内皮生长因子165基因片段,通过DNA重组技术将该基因片段重组于pcDNA4-HisMax-C真核表达载体上,构建成pcDNA4-HisMax-C/VEGF165重组质粒,聚合酶链反应扩增,分别用酶切电泳分析和 DNA 测序的方法对提取和重组 DNA 进行鉴定.pcDNA4-HisMax-C/VEGF165重组质粒转染骨骼肌细胞1周后反转录-聚合酶链反应提取血管内皮生长因子基因并酶切电泳鉴定.结果与结论:构建的重组质粒目的基因片段为人血管内皮生长因子165 cDNA,对大鼠骨骼肌细胞转染后检测到血管内皮生长因子165基因片段.提示成功地克隆了血管内皮生长因子165基因并构建了其真核表达质粒,能以此为载体转染至骨骼肌细胞,并已整合到骨骼肌的基因组参与转录,证明了其转染的有效性.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	徐欣	山东大学口腔医学院	111	454	11.0	13.0
2	卢恕来		29	82	4.0	8.0
3	李涛		16	32	3.0	5.0
4	郑建金		19	29	3.0	4.0
5	吴鸿		11	20	2.0	4.0
6	董刚	山东大学口腔医学院	3	14	1.0	3.0