猪肺炎支原体地方毒株P97-R1基因序列分析及原核表达

• 作者: 张映 贾丽艳 高玉花
• 来源期刊: 中国农学通报
• 学科: 生物学
• 关键词: 猪肺炎支原体 P97-R1 序列分析 原核表达
• 年，卷（期）: 2012,（20）
• 所属期刊栏目: 兽医-应用研究
• 页码范围: 77-82
• 分类号: Q852.62
• 字数: 4590字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1000-6850.2012.20.015

摘要

为克隆和表达猪肺炎支原体(Myeoplasma hyopneumoniae)地方毒株Z株P97-R1基因,探索不同菌株P97-R1基因的差异及其蛋白作为诊断抗原的可能性.本研究根据GenBank登陆的猪肺炎支原体(Mhp)232株P97基因,使用Primer Permier 5.0和DNAman设计引物,以猪肺炎支原体地方毒株Z株基因组DNA为模板,用PCR方法扩增出了P97-R1基因片段,并将该基因片段连接到T-easy和pET-32a载体上分别进行测序和原核表达.测序结果表明:与参考株232株序列对比分析发现Z株P97-R1区发生了多处碱基突变；经DNAstar软件分析表明Z株包含11个5aa重复序列,232株P97-R1区包含15个5aa重复序列,推测R1重复序列的差异与菌株毒力强弱有关.Z株P97-R1基因原核表达产物经SDS-PAGE分析,得到了分子量约为30 KD的蛋白,经Western-blot鉴定表明该表达蛋白具有免疫原性.这为Mhp的诊断、预防及进一步深入研究奠定了基础.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	张映	山西农业大学动物科技学院	99	842	13.0	24.0
2	贾丽艳	山西农业大学食品科学与工程学院	24	116	7.0	10.0
3	高玉花	山西农业大学动物科技学院	4	48	3.0	4.0