小鼠次级淋巴组织趋化因子的原核表达及纯化◆

• 作者: 任向荣 张力丹 林有坤 林青 罗彦彦 苏绍波
• 来源期刊: 中国组织工程研究
• 学科: 医学
• 关键词: 原核表达 CCL21 蛋白纯化 大肠杆菌 小鼠
• 年，卷（期）: 2012,（40）
• 页码范围: 7491-7495
• 分类号: R318
• 字数: 3387字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.2095-4344.2012.40.016

摘要

背景:次级淋巴组织趋化因子(secondary lymphoid-tissue chemokine,SLC/CCL21)是近年来发现的,具有免疫调节作用及抗肿瘤活性.目的:构建小鼠次级淋巴组织趋化因子原核表达载体,并在大肠杆菌中高效表达重组蛋白.方法:取C57BL/6小鼠淋巴结细胞,体外用Poly(I:C)刺激后提取RNA并反转录,以此cDNA为模板,通过PCR技术扩增出CCL21成熟蛋白编码序列.克隆入原核表达载体pBEn-SBP-SET1a,构建融合表达载体pBEn-CCL21.将表达载体转化大肠杆菌BL21(DE3),经异丙基-β-D-硫代吡喃半乳糖苷诱导后TRICINE-SDS-PAGE电泳分析和鉴定重组蛋白的表达.CCL21融合蛋白经链霉亲和柱层析纯化.结果与结论:实验成功构建了CCL21基因的原核表达载体pBEn-CCL21,并获得相应的融合蛋白.结果显示CCL21可在大肠杆菌中高效表达,经链霉亲和柱层析纯化即可获得CCL21重组目的蛋白.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	林有坤	广西医科大学第一附属医院皮肤性病科	101	323	8.0	12.0
2	林青	中山大学中山眼科中心眼科学国家重点实验室	68	231	9.0	11.0
3	罗彦彦	广西医科大学第一附属医院皮肤性病科	7	12	2.0	3.0
4	苏绍波	中山大学中山眼科中心眼科学国家重点实验室	3	1	1.0	1.0
5	任向荣	中山大学中山眼科中心眼科学国家重点实验室	2	0	0.0	0.0
6	张力丹	广西医科大学第一附属医院皮肤性病科	2	0	0.0	0.0