体外培养猪骨髓间充质干细胞hHCN2基因的转染及表达★

• 作者: 张新金 李先花 李建美 闵锐 陶四明
• 来源期刊: 中国组织工程研究
• 学科: 医学
• 关键词: 猪 间充质干细胞 分离培养 超极化活化环核甘酸门控通道 脂质体转染 干细胞
• 年，卷（期）: 2012,（41）
• 页码范围: 7698-7703
• 分类号: R394.2
• 字数: 5021字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.2095-4344.2012.41.020

摘要

背景:通过超极化活化的阳离子电流调制心脏自律性成为该领域研究的焦点.目的:将起搏基因质粒CMV-hHCN2-3xha-IRES-EGFP转染到猪骨髓间充质干细胞,检测其在骨髓间充质干细胞中核酸和蛋白水平是否表达.方法:采用单纯直接贴壁法或密度梯度离心结合直接贴壁法分离、纯化、增殖获得骨髓间充质干细胞,脂质体2000转染质粒CMV-hHCN2-3xha-IRES-EGFP至骨髓间充质干细胞.结果与结论:单纯直接贴壁法收集到的细胞增殖速度慢,而密度梯度离心结合直接贴壁法细胞增殖速度较快,原代细胞培养第3代后转染48 h荧光显微镜下可见骨髓间充质干细胞发出荧光,对照组无荧光.细胞转染率达15%-20%.RT-PCR检测及Western blot 印迹检测证明了hHCN2基因在骨髓间充质干细胞有表达.密度梯度离心结合直接贴壁法较单纯直接贴壁法培养骨髓间充质干细胞的培养效率更高.转染目的基因hHCN2的骨髓间充质干细胞蛋白有表达.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	李建美	昆明医学院第四附属医院心内科	20	101	5.0	9.0
2	陶四明	昆明医学院第四附属医院心内科	11	34	3.0	5.0
3	张新金	昆明医学院第四附属医院心内科	5	6	2.0	2.0
4	李先花	昆明医学院第四附属医院心内科	3	0	0.0	0.0
5	闵锐	昆明医学院第四附属医院心内科	1	0	0.0	0.0