摘要:
背景:软骨细胞具有修复受损软骨组织和维持软骨完整性的重要作用.线粒体功能障碍与细胞凋亡、老化和骨关节炎的病理过程密切相关.目的:通过线粒体 PCR 芯片技术研究骨性关节炎软骨细胞中线粒体基因的差异表达.方法:收集骨性关节炎患者及正常成人车祸后截肢者的关节软骨细胞,经过细胞的提取和培养、RNA 提取和质量检测、mRNA 提取和 cDNA 合成等处理后进行实时定量 PCR 检测.结果与结论:所检测到的84个与线粒体相关的待检测基因中有18个线粒体基因在骨性关节炎中发生了显著改变.以骨性关节炎患者软骨细胞线粒体基因相对正常成人软骨细胞线粒体基因的表达倍数表示基因表达的改变情况,其中倍数改变和倍数调节均大于2的上调基因有 BBC3,BCL2,SLC25A37等15个,倍数改变小于0.5和倍数调节小于-2的下调基因有 CPT1B,SLC25A16,SLC25A24共3个.18个线粒体差异基因功能分类如下:膜极化和电位:BCL2, BCL2L1, TP53, UCP1, UCP3;线粒体转运功能:BCL2, BCL2L1, CPT1B, FXC1(TIMM10B), MFN2, STARD3, TP53, UCP1, UCP3;小分子转运功能:SLC25A16, SLC25A2, SLC25A24, SLC25A31, SLC25A37;靶蛋白:FXC1(TIMM10B),MFN2;线粒体蛋白转入:COX18, FXC1(TIMM10B);内膜转运:FXC1(TIMM10B), TIMM17B;线粒体裂变和融合:COX18, MFN2;线粒体局限化:MFN2;凋亡基因:BBC3, BCL2, BCL2L1, SOD2, P53.结果表明,骨性关节炎软骨细胞中线粒体发生了明显的能量代谢功能障碍.