肝癌石蜡包埋组织miRNA提取方法的优化

• 作者: 党裔武 容敏华 陈罡
• 来源期刊: 重庆医学
• 关键词: 微RNAs 甲醛 石蜡包埋 肝肿瘤 逆转录聚合酶链反应
• 年，卷（期）: 2012,（34）
• 所属期刊栏目: 技术与方法
• 页码范围: 3623-3625
• 页数: 3页
• 字数: 3040字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1671-8348.2012.34.020

摘要

目的 改进并优化从肝癌(HCC)甲醛固定石蜡包埋组织(FFPE)提取并检测微小RNA(miRNA)的方法.方法 使用miRNeasy FFPE试剂盒探讨提取HCC石蜡组织miRNA最佳切片厚度及蛋白酶K作用时间.实时定量RT-PCR检测miR-221、miR-146a、let7-a、miR-191、miR-103及RNU6B的表达量.将HCC细胞制成石蜡组织,对比同一细胞系新鲜细胞及石蜡包埋细胞的各个miRNA表达量差异.结果 切片厚度30 μm,蛋白酶K作用时间48 h时提取miRNA效果最佳.各HCC细胞系及临床HCC石蜡组织均有不同水平的miRNA-221、miR-146a、let7-a、miR-191、miR-103及RNU6B表达.同一细胞系新鲜细胞与石蜡包埋后的各miRNA表达无明显差别.结论 改良后的miRNeasy FFPE 提取方法能提取石蜡组织中的miRNA,可重复性强,可推广用于临床各种石蜡包埋组织的miRNA提取.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	陈罡	广西医科大学第一附属医院病理科	174	613	11.0	15.0
2	党裔武	广西医科大学第一附属医院病理科	68	332	9.0	14.0
3	容敏华	广西医科大学附属肿瘤医院实验研究部	37	159	8.0	9.0