兔脂肪干细胞的多向诱导分化

• 作者: 刁波 刘琴 王清富 蔡贤华 谢永辉 陈庄洪
• 来源期刊: 中国组织工程研究
• 学科: 医学
• 关键词: 脂肪干细胞 干细胞 细胞培养 鉴定 诱导分化 成骨诱导 成脂诱导 CD29 CD44 CD34 CD45
• 年，卷（期）: 2012,（49）
• 页码范围: 162-167
• 分类号: R394.2
• 字数: 6079字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.2095-4344.2012.49.008

摘要

背景:研究表明脂肪干细胞体外特定诱导条件下实现了向骨、软骨、脂肪、肌肉、心肌细胞、神经细胞、上皮细胞以及肝细胞方向分化.目的:进一步验证脂肪干细胞的分离培养方法及其基本生物学特性,并对细胞表型进行鉴定.方法:从成年日本大耳白兔的颈背部分离脂肪组织,通过Ⅰ型胶原酶消化法获取原代脂肪干细胞并培养,待细胞生长至约80%融合时传代,用倒置显微镜逐日观察细胞生长情况和形态特征,描绘其生长曲线;流式细胞技术检测细胞表面标记物;将脂肪干细胞行成骨和成脂诱导,分别通过碱性磷酸酶、茜素红、VonKossa(钙结节)染色和油红 O 染色检测脂肪干细胞成骨分化潜能和成脂分化潜能,以未诱导细胞作为对照组.结果与结论:体外培养的脂肪干细胞呈梭形纤维样细胞形态,增殖活跃,多次传代后细胞仍保持较强增殖能力,生长曲线呈“S”型.流式细胞仪检测第3,6代脂肪干细胞均高表达CD29、CD44,阳性率超过90%;低表达 CD34、CD45阳性率不超过5%,且CD29、CD44随着传代表达逐渐增高,CD34、CD45随细胞培养时间延长表达逐渐降低.成骨诱导实验组碱性磷酸酶、茜素红、vonKossa染色阳性,成脂诱导实验组油红O染色阳性,对照组均为阴性.结果证实,兔脂肪干细胞在体外易于分离培养,保持稳定增殖,并表达间充质干细胞相关的表型,特定条件下可诱导分化为成骨细胞和脂肪细胞.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	刘琴	解放军广州军区武汉总医院骨科	7	31	3.0	5.0
2	刁波	解放军广州军区武汉总医院骨科	2	24	2.0	2.0
3	蔡贤华	解放军广州军区武汉总医院骨科	7	35	4.0	5.0
4	陈庄洪	解放军广州军区武汉总医院骨科	8	41	4.0	6.0
5	王清富	解放军广州军区武汉总医院骨科	1	8	1.0	1.0
6	谢永辉	解放军广州军区武汉总医院骨科	1	8	1.0	1.0