结核分枝杆菌持续感染期抗原Rv1733c的表达、纯化和鉴定

• 作者: 康健 张薇 徐志凯 柏银兰 王丽梅 王平
• 来源期刊: 现代生物医学进展
• 学科: 医学
• 关键词: 结核分枝杆菌 持续感染期抗原Rv1733c 原核表达 纯化
• 年，卷（期）: 2012,（10）
• 所属期刊栏目: 基础研究
• 页码范围: 1868-1871
• 分类号: R378.911
• 语种: 中文

摘要

目的:克隆结核分枝杆菌持续感染期抗原Rv1733c基因,构建其原核表达载体,并在大肠杆菌中进行表达和纯化.方法:采用聚合酶链反应(PCR)方法从结核分枝杆菌H37Rv基因组中扩增出Rv1733c基因片段,克隆入pMD 18-T载体,序列测定正确后将其亚克隆入原核表达载体pPro-EXHTb,并在大肠杆菌DH5α中进行表达,表达蛋白经SDS-PAGE及Western-blot分析后,以Ni-NTA亲和层析纯化蛋白.结果:成功克隆了Rv1733c基因片段并构建了其原核表达载体pPro- EXHTb-1733c,转化E.Coli DH5α后能表达大小约30 KD的蛋白,Western-blot分析表明表达产物正确.通过亲和层析获得纯化蛋白.结论:成功构建结核分枝杆菌持续感染期抗原Rv1733c原核表达载体pPro-EXHTb-1733c,并获得纯化蛋白,为研究新型结核疫苗的靶抗原奠定了基础.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	徐志凯	第四军医大学微生物学教研室	216	1097	15.0	22.0
2	王丽梅	第四军医大学微生物学教研室	57	187	7.0	10.0
3	柏银兰	第四军医大学微生物学教研室	79	325	11.0	13.0
4	张薇	第四军医大学唐都医院儿科	69	395	11.0	15.0
5	康健	第四军医大学微生物学教研室	31	84	5.0	7.0
6	王平	第四军医大学微生物学教研室	12	35	4.0	5.0