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三种非病毒载体对神经母瘤细胞进行转染的效果比较
三种非病毒载体对神经母瘤细胞进行转染的效果比较
作者:
李威
林哲聪
梁兵
袁芳
谢富华
高聪
基本信息来源于合作网站,原文需代理用户跳转至来源网站获取
阳离子脂质体
新型纳米材料
SH-SY5Y细胞
基因转染效率
摘要:
目的 以增强型绿色荧光蛋白(EGFP)为报告基因,研究Lipofectamine2000、改良纳米材料CS(N/P=10)和纳米粒子PAMAM( N/P=20)介导的基因导入系统对神经母瘤细胞SH-SY5Y的毒性及基因转染效率,为神经系统疾病的基因治疗奠定基础.方法 制备Lipofectamine2000、CS和PAMAM与质粒DNA (pDNA)的复合物,分别转染在体外培养的人胚肾细胞Hek293和SH-SY5Y,利用噻唑蓝(MTT)比色实验比较三种载体的细胞毒性作用、用激光共聚焦显微镜观察转染后的细胞形态、倒置荧光显微镜检测转染细胞EGFP表达强度、流式细胞仪检测转染效率.结果 ①Lipofectamine2000、CS和PAMAM转染细胞存活率在Hek293细胞分别为73.09%、73.69%、69.24%,三者比较无显著差异;在SH-SY5Y细胞分别为67.69%、61.71%、42.92%,前两者均显著高于后者(P均<0.05).②Hek293细胞经Lipofectamine2000和CS与pDNA的复合物分别转染后,细胞形态均未发生明显改变,保持梭状生长;而PAMAM/pDNA复合物转染后,细胞发生皱缩,呈圆形分布生长.经三种载体转染后的SH-SY5Y细胞均发生形态改变,其中PAMAM/pDNA复合物转染者形态改变程度相对较大.Hek293细胞和SH-SY5Y细胞中,均以Lipofectamine2000/pDNA复合物转染者EGFP表达强度最大,其次为CS/pDNA复合物、PAMAM/pDNA复合物转染者.④Lipofectamine2000、CS和PAMAM的转染效率在Hek293细胞分别为60.9%、45.2%、42.7%,前者显著高于后两者(P均<0.05);在SH-SY5Y细胞分别为25.3%、19.2%、8.9%,前两者均显著高于后者(P均<0.05).结论 Lipofectamine2000为目前最适于神经系统疾病基因治疗研究的非病毒载体;改良后的新纳米材料CS毒性比PAMAM小、转染效率比PAMAM高,有望在神经系统疾病研究中得到进一步运用.
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篇名
三种非病毒载体对神经母瘤细胞进行转染的效果比较
来源期刊
山东医药
学科
医学
关键词
阳离子脂质体
新型纳米材料
SH-SY5Y细胞
基因转染效率
年,卷(期)
2012,(11)
所属期刊栏目
论著
研究方向
页码范围
8-11
页数
分类号
R346
字数
2857字
语种
中文
DOI
10.3969/j.issn.1002-266X.2012.11.003
五维指标
作者信息
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姓名
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1
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394
11.0
14.0
2
谢富华
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92
6.0
8.0
3
梁兵
12
28
3.0
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4
袁芳
8
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2.0
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5
李威
5
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节点文献
阳离子脂质体
新型纳米材料
SH-SY5Y细胞
基因转染效率
研究起点
研究来源
研究分支
研究去脉
引文网络交叉学科
相关学者/机构
期刊影响力
山东医药
主办单位:
山东卫生报刊社
出版周期:
周刊
ISSN:
1002-266X
CN:
37-1156/R
开本:
大16开
出版地:
济南市燕东新路6号
邮发代号:
24-8
创刊时间:
1957
语种:
chi
出版文献量(篇)
55362
总下载数(次)
42
总被引数(次)
199298
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