重组转化生长因子β1腺相关病毒感染骨髓基质干细胞的活性☆

• 作者: 凌鸣 刘时璋 常彦海 田昕 董向辉 黄向辉
• 来源期刊: 中国组织工程研究
• 学科: 医学
• 关键词: 腺相关病毒 转化生长因子 高效感染 感染活性 骨髓基质干细胞 重组腺病毒 绿色荧光蛋白 感染滴度 骨髓来源干细胞 组织工程
• 年，卷（期）: 2012,（36）
• 页码范围: 6679-6684
• 分类号: R394.2
• 字数: 6776字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.2095-4344.2012.36.006

摘要

背景:目前常用基因载体具有一定缺陷性,无法直接在体内应用.应用腺相关病毒作为转化生长因子β1载体促进软骨修复的研究报道较少. 目的:构建重组转化生长因子β1腺相关病毒,测定病毒滴度,并测定重组病毒对骨髓基质干细胞的感染活性. 方法:PCR方法扩增转化生长因子β1基因,构建重组骨架质粒pAAV-转化生长因子β1-绿色荧光蛋白,与包装质粒pAAV-RC、辅助质粒pAAV-Helper共转染AAV-293细胞包装重组腺相关病毒rAAV-转化生长因子β1-绿色荧光蛋白.应用该重组病毒感染AAV-HT1080细胞测定病毒滴度并鉴定.并感染体外培养的兔骨髓基质干细胞,检测重组病毒感染骨髓基质干细胞的效率及活性. 结果与结论:转化生长因子β1扩增产物测序结果正确,重组骨架质粒pAAV-转化生长因子β1-绿色荧光蛋白双酶切后可见位于1.3 Kb附近转化生长因子β1条带.收获病毒滴度5.2×1011 v.g/mL.鉴定重组病毒rAAV-转化生长因子β1-绿色荧光蛋白包装成功.重组病毒感染骨髓基质干细胞后可于荧光显微镜下观测到绿色荧光蛋白的表达,感染效率达42%.结果证实,成功构建重组腺相关病毒rAAV-转化生长因子β1-绿色荧光蛋白,能够高效感染兔骨髓基质干细胞.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	常彦海	陕西省人民医院骨二科	73	459	11.0	17.0
2	凌鸣	陕西省人民医院骨二科	70	403	10.0	16.0
3	黄向辉	陕西省人民医院骨二科	15	55	4.0	7.0
4	田昕	陕西省人民医院骨二科	17	76	7.0	8.0
5	刘时璋	陕西省人民医院骨二科	47	173	8.0	10.0
6	董向辉	陕西省人民医院骨二科	23	56	5.0	6.0