人脐静脉内皮细胞的原代培养及鉴定

• 作者: 刘珍珍 孙慧琳 李筠 湛奕 蔡德鸿
• 来源期刊: 广东医学
• 学科: 医学
• 关键词: 人脐静脉内皮细胞 细胞原代培养 Ⅷ因子相关抗原
• 年，卷（期）: 2012,（6）
• 所属期刊栏目: 基础研究
• 页码范围: 744-746
• 分类号: R329
• 字数: 3359字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1001-9448.2012.06.008

摘要

目的 建立一种能大量分离人脐静脉内皮细胞(human umbilical vein endothelial cells,HUVECs)体外培养模型,并对其进行鉴定,为体外血管内皮细胞及相关疾病的研究搭建桥梁.方法 采用0.1%Ⅰ型胶原酶分离脐静脉内皮细胞,于M199培养基(含20%胎牛血清,80%M199不完全培养基,1%终浓度为50 μg/mL内皮细胞生长复合物,1%终浓度为100 μg/mL肝素钠,1%青-链霉素,1%L-谷氨酰胺)中培养,待细胞80%以上融合后,用0.25%的胰酶和0.25%的EDTA消化传代,并在倒置显微镜下观察细胞形态,用免疫荧光法对细胞进行鉴定.结果 原代培养的HUVECs在24 h后完全贴壁,2～3 d可达80%的融合,倒置显微镜下观察细胞呈鹅卵石状排布,免疫荧光显示细胞胞浆中Ⅷ因子相关抗原阳性.结论 0.1%Ⅰ型胶原酶消化HUVECs方法 便于操作,细胞获得量多且生长状态良好.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	蔡德鸿	南方医科大学珠江医院内分泌科	159	1128	17.0	25.0
2	孙慧琳	广东药学院附属第一医院内分泌科	22	73	5.0	7.0
3	李筠		10	55	5.0	7.0
4	刘珍珍		7	25	3.0	5.0
5	湛奕	南方医科大学珠江医院内分泌科	6	30	3.0	5.0