HCV多表位复合抗原基因表达条件的探索

• 作者: 李华 杨婷 杨蓉 董丽娟 董承红 谢忠平 龙润乡
• 来源期刊: 实用医学杂志
• 关键词: 丙型肝炎病毒 原核表达 免疫特异性 免疫原性
• 年，卷（期）: 2012,（18）
• 所属期刊栏目: 实验研究
• 页码范围: 3012-3015
• 页数: 4页
• 字数: 4202字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1006-5725.2012.18.012

摘要

目的:筛选出适合HCV多表位复合抗原基因(PCX)表达的菌株,优化表达条件,并进行目的蛋白的免疫特异性的检测.方法:将含HCV多表位复合抗原基因的重组质粒pWR450-PCX转入大肠杆菌DH5α、TOP10F’、BL21菌株中,在不同培养基中,经不同浓度IPTG诱导不同时间,表达融合蛋白(GZ-PCX),并利用患者阳性血清通过Western Blot检测其免疫特异性.结果:重组质粒在DH5α、TOP10F’菌株中均能表达有一定免疫特异性的目的蛋白,但BL21中不表达；目的蛋白在TB培养基中的表达量明显高于LB培养基.结论:在37℃,IPTG浓度为1 mM诱导3h时,目的蛋白的表达量达到峰值;所制备的抗原具有一定的免疫特异性和免疫原性.