蜡梅花香基因SAMT的cDNA克隆及在大肠杆菌中的表达

• 作者: 彭忱晨 李慧芬 陈子柱 马蕾 龙章富
• 来源期刊: 安徽农业科学
• 学科: 生物学
• 关键词: 蜡梅 花香基因 cDNA 克隆 原核表达
• 年，卷（期）: 2012,（3）
• 所属期刊栏目: 生物技术
• 页码范围: 1324-1328,1331
• 分类号: Q939.121
• 字数: 3713字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.0517-6611.2012.03.023

摘要

[目的]研究蜡梅花香基因SAMT cDNA的克隆及表达.[方法]以蜡梅花瓣总RNA为模板进行RT-PCR,扩增得到与预期大小相同的PCR产物带,回收RT-PCR产物,将其与PMD18-T载体进行T-A克隆连接并导入大肠杆菌DH5α,经菌落PCR和双酶切鉴定,筛选带有目的基因的重组质粒并进行测序.[结果]测序证实成功克隆得到蜡梅花香基因SAMT cDNA的ORF片段,其长度为1 196 bp,编码380个氨基酸残基,与已报导的蜡梅SAMT(ABU88887)的同源性为99.2％.将SAMT基因亚克隆到原核表达载体PGEX4T-1中获得重组菌种命名为PGSAMT,用0.01 mol/L的IPTG进行诱导表达,经SDS-PAGE分析,SAMT的融合表达蛋白分子量约为66kDa,与预期的26kDa的GST带和42.3 kDa的蜡梅SAMT基因编码蛋白构成的融合蛋白大小接近.[结论]该研究成功克隆并表达蜡梅花香基因SAMT.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	龙章富	四川大学生命科学学院生物资源与生态环境教育部重点实验室	22	165	8.0	11.0
2	李慧芬	四川大学生命科学学院生物资源与生态环境教育部重点实验室	2	9	2.0	2.0
3	马蕾	四川大学生命科学学院生物资源与生态环境教育部重点实验室	26	131	8.0	10.0
4	彭忱晨	四川大学生命科学学院生物资源与生态环境教育部重点实验室	1	6	1.0	1.0
5	陈子柱	四川大学生命科学学院生物资源与生态环境教育部重点实验室	1	6	1.0	1.0