小鼠紧密连接蛋白ZO-2真核表达载体的构建和表达

• 作者: 付伟 曹秀丽 朱冰柯 梁世倩 梁英民 秦鸿雁 韩骅
• 来源期刊: 现代生物医学进展
• 学科: 生物学
• 关键词: 紧密连接蛋白ZO-2 293T细胞 真核表达
• 年，卷（期）: 2012,（11）
• 所属期刊栏目: 基础研究
• 页码范围: 2001-2004,2016
• 分类号: Q95-33|Q75|Q78
• 语种: 中文

摘要

目的:克隆小鼠紧密连接蛋白ZO-2 (zonula occludens protein2)基因构建其真核表达载体,并验证其在293T细胞系中的表达,为进一步研究其功能奠定基础.方法:从小鼠淋巴结来源的cDNA中分三段分别扩增,通过基因克隆方法获得紧密连接蛋白ZO-2基因全长,连接至pMD- 18T栽体中,酶切测序正确后,插入pEGFP-C2载体中,构建真核表达栽体pEGFP-C2-ZO2.酶切正确后,瞬时转染入293T细胞中,48h后荧光显微镜观察其绿色荧光GFP融合蛋白的表达,并用Western blot检测其在转染细胞中的蛋白水平表达.结果:通过酶切鉴定和测序结果证明成功克隆了ZO-2基因,western blot结果表明成功构建了真核表达栽体pEGFP-C2-ZO2.结论:小鼠紧密连接蛋白ZO-2基因的获得和真核表达载体pEGFP-C2-ZO2的成功构建为下一步研究其生物学功能奠定了基础.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	韩骅	第四军医大学基础部遗传与发育教研室	118	472	11.0	13.0
2	秦鸿雁	第四军医大学基础部遗传与发育教研室	42	148	7.0	9.0
3	梁英民	第四军医大学唐都医院血液内科	68	191	8.0	11.0
4	付伟	第四军医大学唐都医院血液内科	5	10	2.0	3.0
5	梁世倩	第四军医大学基础部遗传与发育教研室	5	23	3.0	4.0
6	曹秀丽	第四军医大学基础部遗传与发育教研室	3	6	1.0	2.0
7	朱冰柯	第四军医大学唐都医院血液内科	1	0	0.0	0.0