化脓性链球菌高毒力株特异基因文库的构建和分析

• 作者: 吴剑锋 夏永祥 田福亮
• 来源期刊: 重庆医学
• 学科: 医学
• 关键词: 链球菌,化脓 抑制消减杂交 毒力基因 基因消减文库
• 年，卷（期）: 2012,（6）
• 所属期刊栏目: 论著
• 页码范围: 529-531
• 分类号: R378
• 字数: 2512字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1671-8348.2012.06.004

摘要

目的 构建化脓性链球菌高毒力株特异基因文库,克隆和筛选化脓性链球菌高毒力株特异表达基因.方法 采用抑制消减杂交技术(SSH),以从患者体内所分离链球菌为毒力菌株,分离特异表达基因,将其与T载体进行T/A连接构建文库,将连接产物转化感受态大肠杆菌TOP10进行文库扩增后,转化菌液涂布于LB固体平板,构建化脓性链球菌毒力株特异基因消减文库,用斑点杂交初步筛选消减文库后,将获得的阳性克隆进行测序和同源性分析.结果 酶切产物为100～2 000 bp,连接效率大于50%,消减组与非消减组差异明显,成功构建了化脓性链球菌毒力株特异基因消减文库,所得阳性克隆经斑点杂交筛选后测序,与Genebank数据库进行同源性比对,5个未知序列可能为新基因,7个与已知基因有高度的同源性.结论 用SSH及T/A克隆技术成功构建了人源化脓性链球菌高毒力株基因文库,5个未知的新序列有待于进一步的研究.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	夏永祥		84	338	11.0	14.0
2	田福亮	南京师范大学生命科学学院	2	6	1.0	2.0
3	吴剑锋		2	1	1.0	1.0