大鼠少突胶质细胞转录因子2基因真核表达载体的构建★

• 作者: 戚举星 曲德伟 欧阳长杰 段线花
• 来源期刊: 中国组织工程研究
• 学科: 医学
• 关键词: 少突胶质细胞转录因子2 重组 质粒 基因表达 转染 COS-7细胞 碱性螺旋-环-螺旋转录因子 组织构建 组织工程
• 年，卷（期）: 2012,（42）
• 页码范围: 7871-7876
• 分类号: R318
• 字数: 5394字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.2095-4344.2012.42.016

摘要

背景:碱性螺旋-环-螺旋转录因子少突胶质细胞转录因子2在脊髓的少突胶质细胞的分化过程中起着关键性的作用.目的:构建大鼠少突胶质细胞转录因子2基因重组真核表达载体,观察其在真核细胞内的表达.方法:从新生大鼠脊髓组织中提取总RNA,采用RT-PCR方法获得目的基因片段,克隆至pGEM-T载体中.经测序确证后将少突胶质细胞转录因子2 cDNA片段与pEGFP-N1载体定向连接.将鉴定正确的重组体pEGFP-N1-Olig2以脂质体法转染至COS-7细胞中,反转录PCR鉴定少突胶质细胞转录因子2 mRNA的表达,免疫印迹法检测少突胶质细胞转录因子2蛋白质表达水平.结果与结论:克隆了少突胶质细胞转录因子2的cDNA,并构建了其真核表达载体pEGFP-N1-Olig2,经限制性内切酶酶切鉴定及测序分析证实了其序列的正确性;转染72 h时免疫印迹分析显示,COS-7/pEGFP-N1-Olig2实验组COS-7细胞表达Olig2-GFP融合蛋白.提示实验成功构建pEGFP-N1-Olig2真核表达载体,并且在COS-7细胞中得到高效表达.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	曲德伟	徐州医学院人体解剖学教研室	15	30	3.0	4.0
2	欧阳长杰	徐州医学院人体解剖学教研室	9	15	2.0	3.0
3	段线花	徐州医学院人体解剖学教研室	2	1	1.0	1.0
4	戚举星	徐州医学院人体解剖学教研室	1	0	0.0	0.0