平果金花茶ISSR-PCR反应体系的建立与优化

• 作者: 史艳财 李承卓 覃小玲 邹蓉 郭亮 陈宗游 黄荣韶
• 来源期刊: 江苏农业科学
• 学科: 农学
• 关键词: 平果金花茶 ISSR-PCR 正交设计 单因素试验
• 年，卷（期）: 2012,（11）
• 所属期刊栏目: 生物技术
• 页码范围: 17-20
• 页数: 4页
• 分类号: S685.14
• 字数: 3612字
• 语种: 中文

摘要

采用正交设计和单因素试验相结合的方法,快速建立并优化平果金花茶ISSR-PCR反应体系和程序.平果金花茶ISSR-PCR适宜的反应体系:20 μL反应体系含模板DNA 50ng、引物0.75 μmol/L、dNTP0.15 mmol/L、Mg2+1.50 mmol/L、TaqDNA聚合酶1.00U、10×buffer 2.00 μL.扩增程序:94℃预变性5min；94℃变性1min,52.2℃退火45 s,72℃延伸1.5 min,45个循环；72℃延伸7 min,4℃保存.经过8份平果金花茶种质的检测,表明该体系稳定、重复性好,可用于平果金花茶遗传多样性分析.