人关节软骨细胞的体外分离、培养与鉴定

• 作者: 张栋 曾照辉 童迅 赵新文 赵海恩 马保安
• 来源期刊: 现代生物医学进展
• 学科: 医学
• 关键词: 人关节软骨 软骨细胞 细胞学
• 年，卷（期）: 2012,（16）
• 所属期刊栏目: 基础研究
• 页码范围: 3040-3044
• 分类号: R318.17|Q813
• 语种: 中文

摘要

目的:研究人关节软骨细胞的体外分离、培养及鉴定方法,观察各代人关节软骨细胞的形态学特性.方法:取人创伤性截肢的无菌膝关节软骨,采用两步酶消化法分离培养人关节软骨细胞,并进行传代培养.通过倒置相差显微镜下观察细胞形态,绘制生长曲线,甲苯胺蓝染色及Ⅱ型胶原免疫组织化学染色对细胞进行鉴定.结果:两步酶消化法消化出的软骨细胞呈圆形,培养2-3天,细胞贴壁、变形,呈三角形或多角形,2周左右细胞融合成层,传代5次后出现去分化.软骨细胞增殖和生长缓慢.形态学、免疫组织化学染色显示细胞培养5代以内可以保持表型的稳定.结论:本研究采用胰蛋白酶及Ⅱ型胶原酶联合消化法获得大量高纯度、高活性的人关节软骨细胞.5代以内细胞生长良好,生物学特性明显,适合于实验研究,5代以后出现去分化现象.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	马保安	第四军医大学唐都医院骨科	178	969	13.0	18.0
2	赵海恩	第四军医大学唐都医院骨科	10	97	4.0	9.0
3	童迅	第四军医大学唐都医院骨科	23	98	6.0	8.0
7	张栋	第四军医大学唐都医院骨科	2	16	1.0	2.0
8	赵新文	第四军医大学唐都医院骨科	6	44	4.0	6.0
9	曾照辉	第四军医大学唐都医院骨科	3	20	2.0	3.0