猴STLV病毒gag蛋白在昆虫细胞中的表达

• 作者: 周晓黎 张利仙 李冰 李维薇 王琼 艾军
• 来源期刊: 中国畜牧兽医文摘
• 关键词: 猴嗜T淋巴白血病病毒 杆状病毒表达载体 昆虫细胞
• 年，卷（期）: 2012,（5）
• 页码范围: 45-46
• 字数: 2286字
• 语种: 中文

摘要

根据已报道的STLV病毒gag蛋白基因(genbank登录号:AY590142),人工合成猴STLV病毒gag基因,通过BamHI和HindIII特异性酶切,将其克隆于昆虫杆状病毒表达载体pFastBacHTB,经PCR、酶切及测序鉴定,成功地构建了猴STLV病毒gag基因杆状病毒表达重组质粒pFastHTB-gag.该重组质粒转化含有杆状病毒穿梭载体的DH10BAC感受态细胞,经卡那霉素、庆大霉素、四环素平板抗性筛选,PCR鉴定,表明获得了转座的杆粒Bacmid-gag.在此基础上,提取Bacmid-gag杆粒,并转染Sf9昆虫细胞,96h后反复冻融细胞,收集上清液,获得杆状病毒,并用来Sf9细胞,收获目的蛋白.通过SDS-PAGE和western bloting分析表明初步获得了表达的gag蛋白且具有良好的生物活性,大小约为52kD,为下一步以表达的gag蛋白为诊断抗原,替代现阶段以分离的病毒抗原和HTLV相关蛋白作为抗原的猴STLV病毒ELISA检测试剂盒的研制奠定了基础.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	艾军		16	113	5.0	10.0
2	李冰	中国科学院昆明动物研究所	67	409	12.0	16.0
3	周晓黎		33	443	13.0	19.0
4	王琼	中国科学院昆明动物研究所	37	205	7.0	13.0
5	李维薇	中国科学院昆明动物研究所	10	24	3.0	4.0
6	张利仙		1	0	0.0	0.0