非酒精性脂肪性肝炎大鼠肝细胞和库普弗细胞同时分离及鉴定

• 作者: 何秀敏 冯高飞 张玉佩 李光秋 杨晓蕾 杨钦河 沈灿宏 王文晶 纪桂元 赵亚凤
• 来源期刊: 广东医学
• 学科: 医学
• 关键词: 非酒精性脂肪性肝炎大鼠 肝细胞 库普弗细胞 同时分离 鉴定
• 年，卷（期）: 2012,（1）
• 所属期刊栏目: 基础研究
• 页码范围: 40-43
• 分类号: R1
• 字数: 4354字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1001-9448.2012.01.020

摘要

目的 建立一种稳定、高效、同时分离非酒精性脂肪性肝炎(nonalcohlic steatohepatitis,NASH)大鼠肝细胞(hepatocytes,HCs)和库普弗细胞(Kupffer cells,KCs)的新方法.方法 采用离体循环灌注Ⅳ型胶原酶,低速离心获取HCs;差速离心、密度梯度离心和选择性贴壁获得KCs.用Typan blue染色和流式细胞术(FCM)分别进行活性和纯度鉴定.结果 每只大鼠获得纯化的HCs[(4.0～4.5)×108]、KCs[(1.5～2.0)×107],经Typan blue染色活力均在95%以上,FCM检测纯度均在90%以上.结论 此实验建立同时分离NASH大鼠HCs和KCs的方法高效、稳定,细胞数量和纯度都符合进一步实验的要求.