神经生长因子对PC12细胞内源性FoxO3a亚细胞分布的影响及其作用机制

• 作者: 廖素芬 张浪 段小鹿 汪海涛 谭小燕 郑文华 黄健初
• 来源期刊: 广东医学
• 学科: 医学
• 关键词: FoxO3a 磷酸化 核转位 神经生长因子
• 年，卷（期）: 2012,（5）
• 所属期刊栏目: 基础研究
• 页码范围: 575-578
• 分类号: R363
• 字数: 4095字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1001-9448.2012.05.001

摘要

目的 研究神经生长因子(nerve growth factor,NGF)对内源性FoxO3a转录因子亚细胞定位的影响及其作用机制.方法 PC12细胞分为血清剥夺组、K252a处理组、NGF处理组及K252a+NGF处理组,通过免疫细胞化学(immunocytochemistry)研究给予NGF及K252a处理后,FoxO3a的亚细胞定位情况.应用表达FoxO3a-GFP融合蛋白的质粒,转染PC12细胞,经NGF及K252a处理,观察FoxO3a-GFP的亚细胞定位.通过蛋白免疫印迹(Western blot)研究NGF及K252a处理对TrkA磷酸化水平的影响;应用PI3K、Akt及ERK信号通路抑制剂研究NGF及K252a对TrkA下游Akt、ERK及FoxO3a信号蛋白磷酸化的影响.结果 PC12细胞剥夺血清及剥夺血清加K252a后,内源性FoxO3a主要分布于细胞核内;给予NGF处理后,内源性FoxO3a则外排至细胞核外;NGF+K252a处理后,K252a则可以阻断NGF的作用,FoxO3a位于细胞核内;过表达外源性GFP-FoxO3a质粒的结果 与此一致,Western blot结果 显示给予NGF处理后,NGF受体TrkA及TrkA下游Akt、ERK及FoxO3a的磷酸化水平显著上升,K252a则阻断了这一作用.同时,PI3K的抑制剂LY294002及Akt的抑制剂Akt inhibitor Ⅷ也阻断了NGF诱导的FoxO3a的磷酸化,但MAPK信号通路的抑制剂PD98059则没有这一作用.结论 NGF可促进内源性FoxO3a磷酸化并转位出核,NGF的作用与激活TrkA受体及其下游激酶有关.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	黄健初		11	52	5.0	7.0