自体血清与胎牛血清培养兔关节软骨细胞的生物学特性

• 作者: 于长隆 傅欣 张继英 段小宁
• 来源期刊: 中国组织工程研究
• 学科: 医学
• 关键词: 兔自体血清 胎牛血清 关节软骨细胞 生物学特性 反分化
• 年，卷（期）: 2012,（46）
• 页码范围: 8599-8606
• 分类号: R318
• 字数: 7398字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.2095-4344.2012.46.010

摘要

背景:目前培养软骨细胞多使用胎牛血清.但近年异种血清培养组织向临床应用的安全性受到质疑,因此自体血清培养越来越受到重视.目的:比较体积分数10%兔自体血清与体积分数10%胎牛血清培养兔关节软骨细胞生物学特性的差异.方法:兔自体血清培养液制备后,分离培养兔关节软骨细胞,分别在体积分数10%自体血清和体积分数10%胎牛血清中进行单层传代培养至1,3,5代,采用光镜观察细胞形态变化,绘制生长曲线评估细胞增殖速度,观察甲苯胺蓝染色、Ⅰ,Ⅱ型胶原免疫组织化学染色结果,以流式细胞仪分析细胞Ⅰ,Ⅱ型胶原以及 CD26,CD44的表达变化.结果与结论:①在细胞形态上自体血清和胎牛血清培养的软骨细胞差异不大.②自体血清培养的软骨细胞较胎牛血清培养的软骨细胞生长速度更快.③甲苯胺蓝染色结果示,无论是自体血清还是胎牛血清所培养的细胞,染色随代龄的增加逐渐变浅,细胞传至第 5代时两组几乎均无异染.对于1代和3代细胞而言,自体血清培养的软骨细胞较胎牛血清所培养的软骨细胞较为深染.④Ⅰ型胶原的表达随代数的增加而增加,而Ⅱ型胶原的表达则随代数的增加而减少.在3代时自体血清培养的软骨细胞Ⅰ型胶原的表达水平低于胎牛血清培养的软骨细胞(P <0.05);在1代和3代时自体血清培养的软骨细胞Ⅱ型胶原的表达水平高于胎牛血清培养的软骨细胞(P <0.05).⑤CD26表达呈现先升高后降低的趋势,而 CD44的表达不随传代数的增加而改变.提示同异体体积分数10%的胎牛血清相比,体积分数10%的自体血清培养的兔软骨细胞生长速度快,且在大部分指标上可以较好地保持细胞表型.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	张继英	北京大学第三医院运动医学研究所	55	527	12.0	20.0
2	傅欣	北京大学第三医院运动医学研究所	36	466	11.0	20.0
3	于长隆	北京大学第三医院运动医学研究所	100	1339	22.0	30.0
4	段小宁	北京大学第三医院运动医学研究所	7	28	4.0	5.0