根癌农杆菌介导的香蕉枯萎病1号生理小种遗传转化体系的优化

• 作者: 戴青冬 杜和禾 毛超 汪军 潘江禹 郭立佳 黄俊生
• 来源期刊: 广东农业科学
• 学科: 农学
• 关键词: 香蕉枯萎病 1号生理小种 根癌农杆菌 突变体 转化
• 年，卷（期）: 2012,（22）
• 所属期刊栏目: 生物技术
• 页码范围: 165-168,前插4
• 页数: 5页
• 分类号: S436.67
• 字数: 3684字
• 语种: 中文

摘要

针对香蕉枯萎病病原菌的1号生理小种(Fusarium oxysporumf.sp cubense race 1,Foc1),以潮毒素抗性为选择标记,建立了根癌农杆菌介导的转化体系,确定影响转化效率主要因子是:YEB平板上单菌落培养时间为40h、在LB液体摇床培养中培养时间28～30 h(200 r/min)、乙酰丁香酮(AS)浓度为200 μmol/L、共培养温度为25C、IM固体培养基pH值为5.5.在此条件下,转化效率能达到150～200个转化子/106个Foc1孢子.在选择性培养基筛选转化子时,我们首次采用了直接覆盖选择性培养基方法,比传统的转膜反贴方法更方便简单.在荧光显微镜下观察到转化子的绿色荧光.潮霉素抗性测试发现转化子的抗性表现稳定.