HIV-1P24蛋白的原核表达及单克隆抗体的制备

• 作者: 刘朝奇 吕佰瑞 姚佳红 杨建林 汪龚泽 覃晓琳
• 来源期刊: 重庆医学
• 学科: 医学
• 关键词: 免疫缺陷病毒 质粒 抗体,单克隆 酶联免疫吸附测定
• 年，卷（期）: 2012,（7）
• 所属期刊栏目: 经验交流
• 页码范围: 696-698
• 分类号: R392.1
• 字数: 4057字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1671-8348.2012.07.026

摘要

目的 制备HIV-1 P24蛋白及单克隆抗体,建立酶联免疫吸附测定(ELISA)法检测HIV感染.方法 聚合酶链反应(PCR)扩增p24基因,并将其克隆到原核表达载体pET-28a(+)中,经E.coli表达并纯化HIV-1 P24蛋白.以纯化P24蛋白抗原免疫Balb/c小鼠,取其脾淋巴细胞与小鼠骨髓瘤SP2/0细胞融合,制备能产生P24单克隆抗体的杂交瘤细胞株,采用Western blot、ELISA技术对制备的单克隆抗体进行初步鉴定,建立检测P24蛋白含量的ELISA竞争法.结果 原核表达重组质粒在E.coli中能高效表达P24蛋白,从杂交瘤细胞中选取能稳定分泌P24单克隆抗体的杂交瘤细胞株,用ELISA竞争法检测HIV-1阳性的血清中P24蛋白含量与病毒载量显著相关.结论 P24蛋白及特异性单克隆抗体成功制备,并建立了检测P24蛋白含量的ELISA竞争法.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	杨建林	三峡大学分子生物学研究所	40	70	5.0	6.0
2	刘朝奇	三峡大学分子生物学研究所	171	552	10.0	15.0
3	姚佳红	三峡大学分子生物学研究所	14	109	7.0	10.0
4	覃晓琳	三峡大学分子生物学研究所	23	62	4.0	7.0
5	吕佰瑞	三峡大学分子生物学研究所	14	30	3.0	5.0
6	汪龚泽	三峡大学分子生物学研究所	8	16	2.0	4.0