PCNA蛋白突变体的真核表达载体构建及鉴定

• 作者: 刘小会 刘朗夏 淡松松 秦焕焕 高学娟
• 来源期刊: 重庆医学
• 学科: 生物学
• 关键词: PCNA蛋白 突变体 真核表达
• 年，卷（期）: 2012,（12）
• 所属期刊栏目: 基础研究
• 页码范围: 1194-1196
• 分类号: Q78
• 字数: 2626字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1671-8348.2012.12.019

摘要

目的 构建带FLAG标签的细胞增殖核抗原(PCNA)蛋白Y211A、Y211D突变型重组质粒,真核表达及鉴定.方法 以FLAG-PCNA野生型基因为模板,运用PCR定点突变技术扩增出带突变位点的基因序列,将其插入真核表达载体pCMV-N-FLAG,进行双酶切实验和测序验证.然后,利用脂质体将重组质粒转染至293T细胞,Western blotting鉴定融合蛋白的表达.结果 FLAG-PCNA(Y211A)、FLAG-PCNA(Y211D)重组质粒测序结果正确,获得PCNA蛋白突变体.结论 成功构建了带FLAG标签的PCNA蛋白Y211A、Y211D真核表达载体,验证了突变型PCNA融合蛋白的表达,为PCNA蛋白功能的深入研究奠定了基础.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	高学娟	暨南大学生命与健康工程研究院	7	1	1.0	1.0
2	刘小会	暨南大学生命与健康工程研究院	8	2	1.0	1.0
3	刘朗夏	暨南大学生命与健康工程研究院	6	1	1.0	1.0
4	淡松松	暨南大学生命与健康工程研究院	1	0	0.0	0.0
5	秦焕焕	暨南大学生命与健康工程研究院	1	0	0.0	0.0