萝卜抽薹性研究的AFLP体系建立与优化

• 作者: 张美霞 林多
• 来源期刊: 中国农学通报
• 学科: 农学
• 关键词: 萝卜 AFLP标记 优化 分析体系
• 年，卷（期）: 2012,（34）
• 所属期刊栏目: 园艺—研究报告
• 页码范围: 166-171
• 页数: 6页
• 分类号: S631.1
• 字数: 4655字
• 语种: 中文

摘要

为探讨萝卜抽薹紧密连锁基因,通过寻找萝卜AFLP体系的酶切时间、相关酶、Mg2+、dNTPs的用量、模板稀释倍数以及扩增循环数等6个重要影响因素的最优水平,探索适合其AFLP的反应体系.结果表明,400 ng DNA用EcoR I(10 U/μL)和Mse I(10 U/μL)各0.2 μL进行酶切10 min,完全满足预扩增和选择性扩增反应的要求,节省了试验成本和酶切时间;Mg2+的浓度是dNTPs浓度的5倍,扩增循环数为35,扩增效果最佳.模板稀释倍数对电泳条带结果影响较大,在预扩增反应中模板稀释5倍,选择性扩增反应中模板稀释倍数为20时反应效果最好,扩增条带带纹清晰.通过该优化体系初步筛选出13个清晰、多态性高的AFLP引物,并在5种不同生态型的16份萝卜材料上进行了验证,条带清楚,多态性强.该优化体系可用于萝卜抽薹紧密连锁基因的研究分析.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	林多	青岛农业大学园林园艺学院	55	498	13.0	19.0
2	张美霞	青岛农业大学园林园艺学院	3	11	3.0	3.0