抗极低密度脂蛋白受体单克隆抗体的大量制备及纯化☆

• 作者: 刘志国 宗义强 屈伸 李琦 杨璞 田俊
• 来源期刊: 中国组织工程研究
• 学科: 医学
• 关键词: 极低密度脂蛋白受体 单克隆抗体 纯化 盐析法 亲和层析
• 年，卷（期）: 2012,（46）
• 页码范围: 8703-8708
• 分类号: R318
• 字数: 5929字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.2095-4344.2012.46.031

摘要

背景:极低密度脂蛋白受体被认为是一种“瑞士军刀”样多功能受体,对该受体的研究很广泛,但其商品化抗体种类较少,价格偏贵.目的:获得研究可用的抗极低密度脂蛋白受体的单克隆抗体.方法:为了获得抗极低密度脂蛋白受体单克隆抗体,选用可分泌针对极低密度脂蛋白受体胞内段的单克隆抗体的杂交瘤细胞 IgG 6A6.通过将杂交瘤细胞 IgG 6A6注入 Balb/c 小鼠腹腔内,2周后收集腹水,分别通过盐析法(正辛酸-饱和硫酸铵沉淀法)初步纯化和亲和层析进一步纯化目的蛋白,获得针对极低密度脂蛋白受体胞内段的单克隆抗体.十二烷基硫酸钠-聚丙烯酰胺凝胶电泳检测其相对分子质量和纯度,酶联免疫吸附实验检测其活性.结果与结论:未纯化腹水 Western Blotting 结果显示条带较多,背景不干净;而经正辛酸-饱和硫酸铵法初步纯化的腹水、经 Protein A 进一步纯化得到的抗体均可特异识别极低密度脂蛋白受体.提示经盐析法和 Protein A Agarose纯化可获得较纯和有活性的单克隆抗体.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	宗义强	华中科技大学同济医学院基础医学院生物化学与分子生物学系	25	99	6.0	8.0
2	李琦	华南理工大学生物科学与工程学院生物医学工程系	12	66	3.0	7.0
3	田俊	华中科技大学同济医学院基础医学院生物化学与分子生物学系	39	207	9.0	12.0
4	杨璞	华南理工大学生物科学与工程学院生物医学工程系	1	3	1.0	1.0
5	刘志国	华南理工大学生物科学与工程学院生物医学工程系	1	3	1.0	1.0