染色质免疫共沉淀超声波破碎条件的研究

• 作者: 刘菊华 张丽丽 张建斌 徐碧玉 王甲水 贾彩红 金志强
• 来源期刊: 中国农学通报
• 学科: 生物学
• 关键词: 拟南芥 染色质免疫共沉淀技术 超声波破碎条件 甲醛交联
• 年，卷（期）: 2012,（30）
• 所属期刊栏目: 生物技术—研究报告
• 页码范围: 208-212
• 页数: 5页
• 分类号: Q-33
• 字数: 4547字
• 语种: 中文

摘要

意在找出拟南芥幼苗适宜的染色质免疫共沉淀(ChIP)超声波破碎的条件,为后期抗体的沉淀提供适当大小的片段.以拟南芥(Columbia ecotype)幼苗为材料,用1％浓度甲醛的缓冲液交联DNA和蛋白质,利用超声波将其染色质随机断裂成适当大小的片段.结果表明,适用于拟南芥幼苗的最佳ChIP试验条件为:用1％甲醛溶液交联DNA和蛋白质的复合物；用65％功率,每次工作20 s,间隔4 min,8次破碎该复合物,可以得到400～800 bp大小的片段,用于后续的试验.经本实验的研究得到了拟南芥幼苗染色质免疫共沉淀超声波破碎的最佳条件,为后续实验奠定了基础.