水稻草状矮缩病毒P2基因多克隆抗体的制备及应用

• 作者: 刘妍 刘小娟 吴祖建 杨靓 王开放 邓萍
• 来源期刊: 中国农学通报
• 学科: 农学
• 关键词: 水稻草状矮缩病毒 P2基因 原核表达 多克隆抗体
• 年，卷（期）: 2012,（30）
• 所属期刊栏目: 农学—研究报告
• 页码范围: 1-5
• 页数: 5页
• 分类号: S432.1|S432.4
• 字数: 4554字
• 语种: 中文

摘要

为了进行水稻草状矮缩病毒(Rice grassy stunt virus,RGSV)诊断方法和蛋白功能研究.通过RT-PCR方法从感染RGSV的水稻中克隆该病毒的P2基因,并将此基因片段重组到原核表达载体pDEST17上.将重组载体转化E.coli Rosetta,经IPTG诱导后获得分子量约为29 kDa含HIS标签的融合蛋白.以诱导的融合蛋白为抗原,免疫新西兰大耳白兔获得多克隆抗体,经酶联免疫检测发现其效价达到1:8192.并用制备的抗体建立了特异、灵敏的检测RGSV的IC-RT-PCR和Dot-blot ELISA方法,为该病毒的检测、诊断提供了保障,同时也为P2蛋白的结构和功能研究奠定了基础.