piggyBac转座子调节pPiggyBac-Rb质粒的构建

• 作者: Joseph M. Kaminski 余克明 庄菁 潘雪珂 田思佳 陈朝
• 来源期刊: 中国组织工程研究
• 学科: 医学
• 关键词: piggyBac转座子 SO-RB50细胞 转染 Rb基因 基因治疗
• 年，卷（期）: 2012,（20）
• 所属期刊栏目: 技术与方法
• 页码范围: 3755-3758
• 分类号: R318
• 字数: 3982字
• 语种: 中文

摘要

背景:外源性Rb基因的导入是抑制视网膜母细胞瘤细胞增殖的有效途径,piggyBac转座子介导的外源基因表达载体高效安全,在基因治疗方面具有广阔的应用前景.目的:探讨piggyBac转座子介导的外源性Rb基因的转染效率及其对视网膜母细胞瘤细胞的抑制作用.方法:采用RT-PCR技术扩增Rb基因编码区Rb cDNA,定向插入到载体pPiggyBac,获得PiggyBac调节的Rb表达质粒pPiggyBac-Rb;通过单独转染或合并pPiggyBac-helper转染人视网膜母细胞瘤细胞SO-RB50.结果与结论:考马斯亮蓝染色证明piggyBac转座子系统的转染效率最高,荧光定量PCR以及免疫荧光实验证明其介导的目的基因Rb与宿主SO-RB50细胞基因组整合效率最高且可在细胞中长期稳定表达,MTT实验证明经其所介导的外源性Rb基因表达对细胞活性影响最为显著.结果提示piggyBac转座子有可能成为视网膜母细胞瘤基因治疗的安全有效载体.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	余克明	中山大学中山眼科中心	16	150	5.0	12.0
2	陈朝	中山大学中山眼科中心	3	20	2.0	3.0
3	潘雪珂	中山大学中山眼科中心	3	20	2.0	3.0
4	庄菁	中山大学中山眼科中心	10	59	5.0	7.0
5	田思佳	中山大学中山眼科中心	1	0	0.0	0.0