小分子干扰RNA介导的RhoA 沉默优化胎肝干细胞培养

• 作者: 刘卫辉 夏宁 寇明文 张宁 杨平 王兴 王涛 赵戈 陶开山
• 来源期刊: 中国组织工程研究
• 学科: 医学
• 关键词: 胎肝干细胞 细胞培养 RhoA RNA 干扰 细胞增殖
• 年，卷（期）: 2012,（10）
• 所属期刊栏目: 技术与方法
• 页码范围: 1803-1807
• 分类号: R394.2
• 字数: 4555字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1673-8225.2012.10.021

摘要

背景:细胞移植治疗是目前的研究热点之一,寻找良好的细胞来源并有效扩增,是大量临床应用的基础.目的:通过沉默RhoA 基因优化胎肝干细胞培养方法.方法:体外培养胎肝干细胞,经小分子干扰RNA 转染以沉默RhoA 基因表达,分为3 组:A 组为干细胞组,B 组为经随机打乱顺序的小分子干扰RNA转染干细胞组,C组为经小分子干扰RNA转染的干细胞组.应用反转录-聚合酶链反应、Westernblot 法检测胎肝干细胞在转染前后RhoA 基因和蛋白的表达;四甲基偶氮唑蓝比色法观察细胞生长的优化作用;流式细胞术测定细胞周期分布的变化.结果与结论:转染小分子干扰RNA后C组与A、B组相比,RhoA基因和蛋白表达量明显降低(P < 0.05),细胞的生长速度明显增快,细胞周期G0/G1期减少,S期细胞数增多,各组间差异有显著性意义(P < 0.05).提示通过沉默RhoA基因的方法可以促进胎肝干细胞增殖,对其培养有优化作用.