胶原酶二步消化法分离培养牛角膜基质成纤维细胞

• 作者: 刘曼丽 曾静 邹文进 黄明汉
• 来源期刊: 中国组织工程研究
• 学科: 医学
• 关键词: 角膜 成纤维细胞 细胞原代培养 细胞形态 生物学特性 消化法
• 年，卷（期）: 2012,（7）
• 所属期刊栏目: 技术与方法
• 页码范围: 1201-1205
• 分类号: R318
• 字数: 5413字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1673-8225.2012.07.015

摘要

背景:获得纯度高、活性强、生物学特性更接近体内状态的角膜基质成纤维细胞是角膜损伤后修复研究的基础.目的:探索体外培养牛角膜基质成纤维细胞的新方法.方法:用Ⅰ型胶原酶对牛角膜基质层进行二步消化分离后制成细胞悬液转入培养瓶中培养,取生长良好的细胞进行传代培养.采用锥虫蓝染色检测消化分离后细胞即刻存活率;倒置相差显微镜动态观察细胞的生长状态;波形蛋白免疫组织化学染色鉴定角膜成纤维细胞;MTT 法检测细胞增殖情况;取处于对数生长期的细胞,绘制细胞生长曲线并计算细胞群倍增时间.结果与结论:在体外成功分离培养牛角膜基质成纤维细胞,显微镜下观察及波形蛋白免疫组织化学染色后证实所培养的细胞为角膜基质成纤维细胞.锥虫蓝染色,细胞即刻成活率达93.5%.细胞生长曲线近似"S"形,其群体倍增时间为38.70 h.说明二步消化法细胞培养技术简便、经济、高效,为原代培养角膜基质成纤维细胞提供了有效渠道.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	曾静	广西医科大学第一附属医院眼科	28	67	4.0	6.0
2	邹文进	广西医科大学第一附属医院眼科	24	141	7.0	10.0
3	刘曼丽	广西医科大学第一附属医院眼科	4	13	3.0	3.0
4	黄明汉		1	4	1.0	1.0