组织块法培养成年兔肌腱细胞

• 作者: 姜涛 张巨 杨光 王振兴
• 来源期刊: 中国组织工程研究
• 学科: 医学
• 关键词: 肌腱细胞 兔 生物学性状 分离 组织块法 组织构建
• 年，卷（期）: 2012,（24）
• 所属期刊栏目: 技术与方法
• 页码范围: 4491-4494
• 分类号: R318
• 字数: 4182字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1673-8225.2012.24.025

摘要

背景:体外分离培养肌腱细胞,熟悉其生物学特性是研究肌腱愈合机制、改善肌腱愈合内环境的前提和基础.目的:采用组织块法体外培养成年兔肌腱细胞,观察其细胞形态、生长增殖情况以及Ⅰ型、Ⅲ型胶原蛋白的表达.方法:无菌条件下取成年新西兰白兔双侧后肢趾屈肌腱,手术显微镜下剥离、去除肌腱外膜组织,剪成组织小块,0.25%胰蛋白酶和0.1%胶原酶Ⅰ消化10~15 min,离心去上清,将组织小块转移到培养瓶中,贴壁后加入1 mL培养液,待细胞游出贴壁生长时,再加培养液继续培养,每3 d换液1次,当细胞长到80%~90%融合时按1∶3传代.结果与结论:一般10 d左右细胞会从组织块游出贴壁生长,此时细胞多呈星形或不规则形,随着时间延长细胞逐渐增多,呈梭形的成纤维细胞样.传代细胞刚接种时圆形,4~6 h开始贴壁并伸展为梭形,排列逐渐规则成群.从传代细胞的生长曲线可看出,前4 d细胞生长较慢,为潜伏期,第5天后进入快速增殖期,7 d以后进入平台期.免疫荧光法证实Ⅰ型胶原染色阳性,而Ⅲ型胶原染色呈阴性.结果表明采用组织块法可在体外成功培养成年兔肌腱细胞.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	张巨	吉林大学中日联谊医院手外科	51	213	8.0	11.0
2	姜涛	吉林大学中日联谊医院血管外科	71	266	8.0	13.0
3	杨光	吉林大学中日联谊医院手外科	145	721	14.0	20.0
4	王振兴	吉林大学中日联谊医院手外科	15	44	5.0	6.0