红毛藻R-藻红蛋白的高效制备以及抗体标记与检测

• 作者: 刘光明 刘婷 曹敏杰 沈建东 蓝伟光
• 来源期刊: 食品工业科技
• 学科: 工学
• 关键词: R-藻红蛋白 荧光探针 交联 免疫检测
• 年，卷（期）: 2012,（17）
• 所属期刊栏目: 生物工程
• 页码范围: 147-150
• 分类号: TS254.58
• 语种: 中文

摘要

采用硫酸铵盐析和DEAE-Sepharose阴离子交换柱层析相结合，从红毛藻（Bangia知c0-purpuma）中分离纯化到纯度系数（A565／A280）大于6．0的R-藻红蛋白。SDS-PAGE结果显示，其亚基分子量分别为19、21ku。用适宜摩尔浓度的异型双功能交联剂N-琥珀酰亚氨基-3-2-吡啶基二硫丙酸醇（SPDP）将纯化的R-藻红蛋白与羊抗小鼠IgG抗体交联．利用SDS-PAGE和荧光检测鉴定R-藻红蛋白与抗体的交联效果。结果显示：R-藻红蛋白能与羊抗小鼠IgG成功交联。分别采用Dot blot和Western blot对R-藻红蛋白标记的抗体作为二次抗体，小鼠抗鲢鱼主要过敏原小清蛋白单克隆抗体为-次抗体；对鱼类小清蛋白进行免疫检测，结果显示：R-藻红蛋白标记的抗体能检测相关抗原的存在，且有良好的特异性。利用藻红蛋白荧光探针可缩短免疫杂交的检测时间，简化操作过程。

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	蓝伟光		19	260	7.0	16.0
2	刘光明	集关大学生物工程学院	3	23	3.0	3.0
3	曹敏杰	集关大学生物工程学院	4	31	4.0	4.0
4	沈建东	集关大学生物工程学院	2	12	2.0	2.0
5	刘婷	集关大学生物工程学院	1	4	1.0	1.0