小麦wx—B1a基因片段的克隆及其RNAi载体构建

• 作者: 刘子渲 尤明山 常柳 张付芸 徐婧 梁荣奇
• 来源期刊: 中国农学通报
• 学科: 生物学
• 关键词: 普通小麦 wx蛋白 表达载体
• 年，卷（期）: 2012,（12）
• 所属期刊栏目: 农学—研究报告
• 页码范围: 33-38
• 分类号: Q782
• 字数: 4257字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1000-6850.2012.12.007

摘要

为了获得小麦wx-B1a基因的特异RNAi表达载体,以小麦品种‘京花1号’开花12天的籽粒为材料,用天根公司植物总RNA提取试剂盒提取总RNA,以wx-B1a基因(GenBank NO:AB019623)的cDNA序列设计一对特异性引物,利用RT-PCR克隆了wx-B1a基因部分cDNA片段.Blastn结果显示,它与GenBank上报道的Triticum aestivum wx-1 gene (GenBank NO:EU719611.1)同源.通过酶切连接将此片段分别置于拟南芥FAD2的Intronl (GenBank NO:AJ271841)的上、下游,然后将此发夹结构置于小麦HMW-GS 1Dx5启动子的下游,从而构建了小麦wx-B1a基因的特异RNAi表达载体pBAC47p-wx-Bl aIR.从而为下一步转化高产强筋小麦品种培育优质面条专用小麦奠定基础.