His-tag对亚油酸异构酶在大肠杆菌中可溶性表达的影响

• 作者: 宋元达 张灏 张白曦 汪昶沛 许正凯 陈卫 陈海琴
• 来源期刊: 食品工业科技
• 学科: 工学
• 关键词: 亚油酸异构酶 大肠杆菌 6×His-tag 可溶性
• 年，卷（期）: 2012,（18）
• 所属期刊栏目: 生物工程
• 页码范围: 217-220
• 分类号: TS201.2
• 语种: 中文

摘要

为了研究6×His-tag对来源于痤疮丙酸杆菌的亚油酸异构酶（PAI）可溶性重组表达的影响,我们构建了三种大肠杆菌重组菌株,表达了三种重组PAI：C端带有His-tag亲和标签、N端带有His-tag亲和标签和不加His-tag亲和标签。通过SDS-PAGE和Westernblot分析重组蛋白表达情况,并利用气相色谱检测酶活。实验结果表明：在相似的诱导表达条件及生长状态下,三种大肠杆菌重组菌株均成功表达了具有亚油酸异构酶活性的重组蛋白质,三种重组PAI的表达总量相当,6×His-tag的融合表达促进了PAI蛋白质包涵体的形成,而C端6×His-tag带来的影响最大。