人组织型纤溶酶原激活剂(t-PA)(1354-1802)的原核表达及抗血清制备

• 作者: 何洪彬 刘晓 李秀梅 武建明 王洪梅 王立群 王青泉
• 来源期刊: 安徽农业科学
• 学科: 农学
• 关键词: t-PA 原核表达 抗血清
• 年，卷（期）: 2012,（16）
• 所属期刊栏目: 动物科学·饲料科学
• 页码范围: 8905-8907
• 分类号: S852.5
• 字数: 3348字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.0517-6611.2012.16.046

摘要

[目的]制备人组织型纤溶酶原激活剂t-PA(1354-1802)抗血清,并测定其效价,为深入研究t-PA基因功能奠定基础.[方法]利用基因克隆技术获得t-PA(1354-1802)催化域基因片段,然后将其重组到pET-32a(+)质粒中,进行鉴定及序列分析;将测序正确的阳性质粒转化大肠杆菌BL21感受态细胞,IPTG诱导、蛋白纯化及免疫兔试验.[结果]SDS-PAGE结果显示,37 kD处出现特异性条带;对该融合蛋白进行分离纯化后免疫新西兰兔,制备t-PA蛋白抗血清,Western blot分析表明,抗血清可与标准品t-PA蛋白特异性结合,间接ELJSA方法检测抗血清的效价可达到1∶12 800.[结论]成功制备了t-PA(1354-1802)抗血清,为t-PA基因功能的深入研究奠定了基础.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	王洪梅	山东省农业科学院奶牛研究中心	101	626	12.0	18.0
2	王立群	东北农业大学生命科学学院	68	649	14.0	22.0
3	何洪彬	山东省农业科学院奶牛研究中心	59	320	10.0	13.0
4	刘晓	山东省农业科学院奶牛研究中心	27	136	7.0	10.0
5	武建明	山东省农业科学院奶牛研究中心	15	57	5.0	7.0
6	王青泉	东北农业大学生命科学学院	1	0	0.0	0.0
10	李秀梅	山东省农业科学院奶牛研究中心	2	0	0.0	0.0