微小隐孢子虫miR-2980真核表达载体的构建及初步鉴定

• 作者: 周鹏 呼高伟 曹薇 秦培兰 程天印 米荣升 陈兆国 黄燕
• 来源期刊: 安徽农业科学
• 学科: 农学
• 关键词: cp-miR-2980 前体 真核表达载体 RT-PCR
• 年，卷（期）: 2012,（13）
• 所属期刊栏目: 动物科学·饲料科学
• 页码范围: 7739-7741,7803
• 分类号: S852.723
• 字数: 3367字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.0517-6611.2012.13.048

摘要

[目的]构建微小隐孢子虫的miR-2980真核表达载体,并进行鉴定.[方法]从微小隐孢子虫(Cryptosporidium parvum)基因组DNA扩增cp-miR-2980前体,克隆到pMD18-T载体上,经测序鉴定正确后亚克隆到pVAXI载体上,转染HCT-8细胞,提取细胞总RNA,RT-PCR检测cp-miR-2980的表达.[结果]成功构建了cp-miR-2980真核表达载体pVAX-miR2980,RT-PCR检测证实其能在真核细胞HCT-8中表达.[结论]构建的真核表达载体pVAX-miR2980能在HCT-8细胞中成功表达cp-miR-2980,为后续研究cp-miR-2980的功能奠定了基础.