羊布鲁氏菌16M Omp25蛋白酵母双杂交诱饵表达载体的构建及其毒性和自激活效应检测

• 作者: 屈海龙 张瑞 李晓燕 王兴龙 王海浪 王秀然 钱晶 陈思
• 来源期刊: 安徽农业科学
• 学科: 农学
• 关键词: Omp25蛋白 诱饵质粒 自激活作用
• 年，卷（期）: 2012,（19）
• 所属期刊栏目: 动物科学·饲料科学
• 页码范围: 10156-10159
• 分类号: S811.6
• 字数: 4305字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.0517-6611.2012.19.068

摘要

[目的]构建含羊布鲁氏菌16M Omp25基因的酵母双杂交诱饵质粒,检测诱饵质粒表达产物对cdc25H酵母细胞有无毒性作用以及对报告基因有无激活作用.[方法]聚合酶链反应(PCR)扩增布鲁氏菌Omp25基因的编码序列,定向克隆到酵母表达栽体pSos上,构建诱饵重组质粒pSos-Omp25,经测序正确后,将其将转化到酵母菌cdc25H感受态细胞,检测其表达产物对酵母细胞有无毒性作用及对报告基因有无激活作用.[结果]序列测定证明重组诱饵质粒pSos-Omp25构建成功；重组质粒表达产物对cdc25H酵母细胞无毒性,对报告基因无激活作用.[结论]利用SOS恢复系统(SRS)成功构建了羊布鲁氏菌16M Omp25蛋白酵母双杂交诱饵质粒,为筛选与羊布鲁氏菌16M Omp25蛋白相互作用的蛋白创造了条件.