转录因子Ets-2调控小鼠成釉细胞MMP-20基因表达的研究

• 作者: 孙学玲 孙岩 孙霞 李东亮 王青山 纪虹利 韩婷婷 高玉光
• 来源期刊: 口腔医学研究
• 学科: 生物学
• 关键词: 转录因子Ets-2 基质金属蛋白酶-20 免疫组化 RT-PCR 双荧光素酶报告基因检测
• 年，卷（期）: 2013,（1）
• 所属期刊栏目: 基础研究论著
• 页码范围: 1-4,8
• 页数: 5页
• 分类号: Q132
• 语种: 中文

摘要

目的:通过研究Ets-2转录因子对调控小鼠成釉细胞金属基质蛋白酶-20(matrix metalloproteinase-20,MMP-20)基因表达的调控作用,进一步明确Ets-2在釉质发育中的作用.方法:应用免疫组化方法观察出生后5d小鼠切牙成釉细胞中Ets-2的表达；在小鼠成釉细胞中分别转染200ng pcDNA3.1/myc-HisA-Ets-2和Ets-2 siRNA后,利用实时定量RT-PCR法检测MMP20基因表达的不同变化；用双荧光素酶报告基因检测系统分析Ets-2对MMP-20启动子突变后转录活性的影响.结果:免疫组化显示Ets-2在成釉细胞中呈阳性表达.实时定量RT-PCR研究发现Ets-2过表达后,MMP-20表达水平显著增加；当Ets-2基因沉默后,MMP-20表达水平则显著下降.双荧光素酶报告基因检测系统检测显示,转染pcDNA3.1/myc-HisA-Ets-2的实验组与对照组相比,MMP-20启动子的转录活性升高；对启动子Ets潜在结合部位进行定点突变后,MMP-20启动子的转录活性显著下降,Ets-2丧失上调MMP-20启动子转录活性的作用.结论:小鼠成釉细胞核中Ets-2可通过MMP-20启动子上Ets潜在结合位点,上调MMP-20基因表达水平.