重组人TNF-α在大肠杆菌中的表达、纯化及生物学活性研究

• 作者: 张娟 王旻 缪小牛 解伟 陈卫
• 来源期刊: 药物生物技术
• 学科: 生物学
• 关键词: 人肿瘤坏死因子α 原核表达 亲和纯化 序列优化 TEV蛋白酶
• 年，卷（期）: 2013,（2）
• 所属期刊栏目: 研究论文
• 页码范围: 95-99
• 页数: 5页
• 分类号: Q812
• 语种: 中文

摘要

构建有利于人肿瘤坏死因子α(TNF-α)大量表达及有效纯化的原核表达载体,并在大肠杆菌中诱导表达.通过密码子优化构建表达质粒pET28-TNF,并将其转化入大肠杆菌,对表达条件进行优化后进行大量表达并通过两轮镍柱亲和纯化获得高纯度重组人TNF-α(rhTNF-α)蛋白.应用Western blot和细胞测活分别检测重组人TNF-α蛋白的抗原性和细胞毒活性.成功构建了重组人TNF-α原核表达载体,并通过表达纯化获得了纯度＞95％,具有生物活性(LD50＜ 10 ng/mL)的rhTNF-α蛋白.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	王旻		170	1536	20.0	32.0
2	张娟		44	98	6.0	9.0
3	陈卫		8	94	4.0	8.0
4	缪小牛		2	0	0.0	0.0
5	解伟		3	0	0.0	0.0