靶向HOXA9基因RNAi慢病毒载体增加人急性单核细胞白血病U937细胞的药物敏感性

• 作者: 朱立平 李建厂 贾秀红
• 来源期刊: 肿瘤
• 学科: 医学
• 关键词: 白血病 慢病毒 RNA干扰 抗药性,肿瘤 基因,HOXA9 细胞,U937
• 年，卷（期）: 2013,（1）
• 所属期刊栏目: 基础研究
• 页码范围: 21-27
• 页数: 7页
• 分类号: R733.7
• 字数: 6271字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3781/j.issn.1000-7431.2013.01.004

摘要

目的:探讨慢病毒载体介导的短发夹RNA (short hairpin RNA,shRNA)沉默同源盒A9 (homeobox A9,HOXA9)基因对人急性单核细胞白血病U937细胞药物敏感性的影响.方法:应用蛋白质印迹法从4条针对HOXA9基因的RNA干扰(RNA interference,RNAi)慢病毒载体中筛选出1条敲减效率最高的包装成慢病毒HOXA9/GV118RNAi-LV#2.实验分成未感染对照组(control,CON)、阴性对照组(negative control,NC)及敲减组(knock down,KD).HOXA9/GV118RNAi-LV#2感染U937细胞后,应用实时荧光定量PCR法检测HOXA9 mRNA的沉默效率,蛋白质印迹法检测HOXA9蛋白的表达,MTT法和FCM检测病毒感染前后U937细胞对长春新碱(vincristine,VCR)和柔红霉素(daunorubicin,DNR)的敏感性及细胞凋亡率变化,RT-PCR法检测DNR作用后各组细胞中MDR-1 mRNA的表达.结果:KD组细胞中HOXA9 mRNA的沉默效率在55％以上,HOXA9蛋白的表达量明显减少.VCR及DNR作用KD组细胞的半数抑制浓度(half inhibitory concentration,IC50)值明显降低(P＜0.01),药物敏感性明显增强；VCR和DNR作用后,KD组细胞的凋亡率明显增加(P＜ 0.01)； DNR作用后,KD组U937细胞中MDR-1 mRNA的表达水平明显下调(P＜0.01).结论:靶向HOXA9基因的RNAi慢病毒可稳定沉默HOXA9基因的表达,在一定程度上提高U937细胞对化疗药物的敏感性.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	贾秀红	滨州医学院附属医院儿科	115	345	8.0	13.0
2	李建厂	滨州医学院附属医院儿科	67	200	6.0	10.0
3	朱立平	滨州医学院附属医院儿科	6	23	4.0	4.0