稳定表达流感病毒基质蛋白2的哺乳动物细胞系的建立

• 作者: 姚立红 张智清 殷继永 郭建强 陈爱珺
• 来源期刊: 病毒学报
• 学科: 农学
• 关键词: 基质蛋白2 流感病毒 哺乳动物细胞系
• 年，卷（期）: 2013,（1）
• 所属期刊栏目: 论著
• 页码范围: 7-11
• 页数: 5页
• 分类号: S852.65
• 语种: 中文

摘要

本研究构建了稳定表达甲型流感病毒基质蛋白2(M2)的哺乳动物细胞系.应用PCR方法扩增A/PR/8/34(H1N1)株流感病毒M2基因,将其克隆至真核表达载体pcDNA5/FRT(pDF)上,构建出pDF-M2重组质粒.将鉴定正确的pDF M2与表达Flp重组酶的pOG44质粒共转染Flp-In-CHO细胞,通过体内同源重组使目的基因整合到宿主细胞染色体上.筛选具有Hygromycin B抗性的重组细胞株命名为CHO-M2.以间接免疫荧光法(IFA)和Western blot法检测M2的表达,共获得15株高表达M2蛋白的重组细胞株.这些重组细胞株在连续培养10代后,PCR方法仍可检测到M2基因的存在,IFA也检测到蛋白的稳定表达.本研究成功获得了稳定表达甲型流感病毒M2的哺乳动物细胞系,为M2蛋白的功能研究和非复制型流感病毒疫苗的研制提供了新的工具.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	姚立红		18	46	3.0	6.0
2	张智清		33	116	7.0	9.0
3	陈爱珺		13	8	2.0	2.0
4	郭建强		13	13	2.0	3.0
5	殷继永		17	34	4.0	4.0